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技术成果

编号
365
类别 专利
项目名称
CRISPR/Cas9 介导的大片段DNA 拼接方法
项目简介
本发明提供了一种适用于酵母基因组改造的CRISPR/CAS9系统。
关键字
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项目和技术情况
基本信息
本发明公开了 CRISPR/Cas9 介导的大片段 DNA 拼接方法。具体而言,本发明提供能在酵母中组成型表达 Cas9 的核酸构建物,该核酸构建物含有与 cas9 基因操作性连接的酵母 Tef1 启动子,来自 pBR322 的复制起始位点及其筛选标记和来源于 CEN6 ARS4 的复制区及其筛选标记,所述核酸构建物在酵母中为单拷贝复制,在大肠杆菌中为高拷贝复制。本发明还提供能在酵母中组成型表达 sgRNA 的核酸构建物、作为受体载体使用的核酸构建物以及 DNA 拼接方法。利用本发明可将两个以上待拼接大DNA 片段直接在酵母菌中一次成功拼接为大质粒,省去了低效率的大片段 DNA 的体外酶切回收及遗传转化等操作,比传统方法更方便高效。
成熟产品或解决方案
小试阶段
是否申请专利,有哪些
专利申请目前实质审查中,尚未授权。
拟转让对象
微生物发酵、医药、食品、保健品、工业酶、化工领域的企业
资金需求
面议
可出让的股份比例
面议
是否已转化
-
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